You are here: Home -  Moncler Online enzym samengevoegd in insluitingslichaampjes kon worden

Moncler Online enzym samengevoegd in insluitingslichaampjes kon worden

Moncler Online

Flavonolen, een klasse van bioactieve polyfenolen aanwezig in planten, zijn de producten van flavonol desaturatie gekatalyseerd door flavonolsynthase (FLS). We gekloneerde cDNA codeert voor het enzym FLS uit Camellia sinensis (CsFLS) van end-to-end PCR gevolgd door 5'- en 3'-RACE. De vermeende CsFLS had 333 aminozuurresiduen, weergegeven identiteiten de FLSS van Arabidopsis en Ginkgo van 53% en 52,5%, respectievelijk, en bevatte een aantal geconserveerde elementen in het 2-oxoglutaraat-Fe (II) -dioxygenase superfamilie. Het cDNA van CsFLS werd gesubkloneerd in pET28a (+) Moncler Online en ingebracht in Escherichia coli (BL21-CodonPlus-RIL). Inductie met 0,1 u0026 nbsp; mM IPTG bij lage temperatuur (20 u0026 nbsp; ° C) hebben geleid tot hogere bedragen van CsFLS in Moncler Shop Online Sale de oplosbare fractie dan inductie bij 30 u0026 nbsp; ° C. Het enzym samengevoegd in insluitingslichaampjes kon worden gered door denaturatie met 6 u0026 nbsp; M ureum en zuiveren met behulp van een His · Bind zuivering kit. Het gezuiverde eiwit werd ontzout door Amicon Ultra-15 centrifugaal filter unit, en de His-tag werd verwijderd met trombine. Het uiteindelijk gezuiverde eiwit werd getest met dihydroquercetine als substraat en de producten werden geanalyseerd door HPLC. De toevoeging van FeSO4 de buffers die in de CsFLS zuivering sterk toegenomen terugwinning van actief enzym. De in deze studie verkregen CsFLS bleek hogere specifieke activiteit en lagere Km dan eerder gerapporteerde FLSS.
0 Reacties


Spreek uw mening